肝組織HE服務是病理學診斷中常用的一項關鍵技術，通過蘇木精-伊紅（HE）染色法對肝組織切片進行染色，以清晰顯示細胞和組織的形態結構，輔助醫生進行疾病診斷和研究。

　　該服務基于HE染色的經典原理：蘇木精作為堿性染料，使細胞核中的染色質與胞質內的核糖體呈現紫藍色；伊紅作為酸性染料，使細胞質和細胞間質中的成分呈現紅色或粉紅色。通過這兩種染料的結合，肝組織中的細胞形態、結構及病理變化得以清晰呈現。

　　肝組織HE服務是病理檢測中常用的技術，用于觀察肝組織的形態結構、細胞排列及病理改變（如炎癥、壞死、纖維化等）。其操作需嚴格遵循規范，以確保切片質量和診斷準確性。以下是相關注意事項：

　　一、標本采集與固定階段

　　標本采集

　　肝組織取材需迅速，避免因缺血、自溶導致細胞結構破壞（尤其是動物實驗或手術標本，應在離體后30分鐘內固定）。

　　取材大小適中：通常為1cm×1cm×0.3cm（厚度不超過0.5cm），確保固定液能充分滲透組織，避免中心部位固定不良。

　　若為肝穿刺標本，需標記穿刺方向，避免切片時遺漏關鍵區域；若組織易碎（如肝硬化標本），需輕柔操作，防止機械損傷。

　　固定處理

　　固定液選擇：使用10%中性福爾馬林（甲醛濃度3.7%~4%，pH 7.0~7.4），固定液體積應為組織體積的5~10倍，避免因液體不足導致固定不充分。

　　固定時間：常規肝組織固定6~24小時（小型標本6~12小時，較大標本12~24小時），過長可能導致組織過硬，影響切片；過短則細胞結構不清。

　　特殊情況：若需保留糖原等成分，可使用冷固定液（4℃）；若組織含較多血液，可先用生理鹽水沖洗后再固定。

　　二、組織處理（脫水、透明、包埋）

　　脫水

　　梯度乙醇脫水：依次經70%、80%、95%（Ⅰ、Ⅱ）、100%（Ⅰ、Ⅱ）乙醇處理，每步時間根據組織大小調整（通常30~60分鐘），確保徹d脫去水分。

　　避免跳過低濃度乙醇直接用高濃度，否則可能導致組織收縮、細胞變形（尤其肝血竇豐富，易受影響）。

　　透明與浸蠟

　　透明劑（如二甲苯）需新鮮，避免雜質污染，透明時間適中（通常15~30分鐘），過長會使組織變脆，過短則蠟無法充分浸潤。

　　浸蠟需在恒溫箱中進行（60℃左右），使用熔點56~58℃的石蠟，分2~3次浸蠟（每次30~60分鐘），確保蠟完q取代透明劑，避免切片時出現空洞。

　　包埋

　　包埋時肝組織需放平，切面朝下，確保后續切片能完整顯示肝小葉結構（中央靜脈、匯管區等關鍵區域）。

　　包埋蠟塊需冷卻充分，避免蠟塊內有氣泡，否則切片易碎裂。

　　三、切片與貼片

　　切片

　　切片厚度控制在3~5μm（肝組織較柔軟，過厚易重疊，過薄易破碎），使用鋒利的切片刀或一次性刀片，避免刀痕。

　　切片時保持蠟塊溫度穩定（可使用恒溫切片機），防止組織皺縮或斷裂，尤其肝硬化組織因纖維化較硬，需調整切片角度和速度。

　　貼片與烤片

　　貼片前需清潔載玻片（避免油污影響黏附），可使用多聚賴氨酸或APES處理載玻片，防止脫片。

　　切片在45~50℃溫水浴中展平（水溫過高可能導致細胞脫落），輕輕撈取后瀝干水分，置于60~65℃烤箱中烤片2~4小時（或37℃過夜），徹d烘干水分，避免染色時脫片。

　　四、染色過程

　　脫蠟與水化

　　二甲苯脫蠟需徹d（2次，每次5~10分鐘），后續經梯度乙醇（100%、95%、80%、70%）水化至蒸餾水，每步1~3分鐘，避免脫蠟不凈導致染色不均。

　　蘇木精染色

　　蘇木精染液需新鮮（或過濾后使用），染色時間根據染液濃度和組織類型調整（通常5~10分鐘），肝細胞核應染成深藍色，避免過染（導致核結構模糊）或欠染（核不清）。

　　分化步驟關鍵：用1%鹽酸乙醇分化數秒至數十秒，直至組織變為淡粉色，立即用流水沖洗返藍（10~15分鐘），確保核質對比清晰。

　　伊紅染色

　　伊紅染液染色時間通常1~3分鐘，使肝細胞質、結締組織等染成粉紅色，染色后經梯度乙醇脫水（70%、80%、95%、100%），避免水分殘留導致褪色。

　　透明與封片

　　二甲苯透明需充分（2次，每次5分鐘），確保切片透明無霧狀。

　　封片時使用中性樹膠，避免產生氣泡，蓋玻片需緩慢放下，防止擠壓組織，封片后平放晾干（或37℃烘干），避免樹膠流淌。

　　五、質控與存儲

　　質量控制

　　染色后需鏡檢：肝小葉結構完整，肝細胞、膽管、血管等形態清晰，核質對比分明（核藍、質紅），無皺縮、脫片、染色不均等問題。

　　若出現異常（如脫片、染色過淺），需追溯原因（如烤片不充分、染液失效）并重新處理。

　　標本與切片存儲

　　剩余肝組織標本需在固定液中冷藏（4℃）保存，標記清晰（編號、取材日期、患者信息等）。

　　染色后的切片需避光、干燥存儲，避免陽光直射導致褪色，長期保存可使用密封盒防潮。